微生物纯培养是单细胞培养物或无性繁殖系，通常由挑取单个菌落或利用单细胞分离技术，繁殖获得。

一、技术要求

1.微生物纯度检测过程应该按照 《不同生物安全级别微生物菌种操作规程》进行。

2.纯度检测过程应注意无菌操作，避免污染。

3.使用的器皿要求清洁，透明，无破损，无裂痕。

4.根据微生物特性选择合适的培养基，参考《中国菌种目录》。

二、微生物菌种纯度检测

1.细菌和古菌的纯度检测

1.1 菌落形态 在适宜的培养基上，将待检测的培养物稀释涂布或划线，在适宜的温度，氧气，光照等条件下培养，观察同一平板上的菌落大小，颜色，形状，质地光泽等是否相似；对于出现两种或以上形态菌落的初发菌株，应重新挑取划线或稀释涂布，检测是否重复出现相同的特征。

1.2细胞形态 应检测细胞形态的相似性，对数生长期培养物革兰氏染色反应应呈现一致性，细胞的大小，形状应该相似，鞭毛数量及着生位置，运动特性等应该一致。检测培养物是否形成芽孢，芽孢的大小，位置，形状应该相似

2.放线菌菌种纯度检测

2.1菌落形态 在适宜条件下将待检测的培养物划线或涂布，在同一平板上单菌落的形状大小，质地，光泽，颜色等应相似。如果怀疑有细菌污染，则30℃液体培养24h，培养液不应浑浊，如果浑浊则视为细菌污染。

2.2培养特征 分别接种三种以上的培养基，在培养基上气生菌丝，基内菌丝，可溶性色素的颜色等培养特征应该一致。

2.3孢子丝及孢囊 在适宜的培养条件下，孢子的着生方式，孢子丝的形态颜色或孢囊的着生位置及形状，大小应呈现一致

3.酵母菌种纯度检测

3.1菌落形态 在适宜的培养基上，将待检测的培养物稀释涂布或划线，在适宜的温度，氧气，光照等条件下培养，观察同一平板上的菌落大小，颜色，形状，质地光泽等是否相似

3.2个体形态 应对样品的个体形态进行检查，在指定的培养基及培养条件下，细胞的形状大小应一致。

3.3繁殖方式 繁殖方式应该一致，如是芽殖，看一端，两端，三端或是多边芽殖。

4.丝状菌种的纯度检测

4.1菌落特征 在适宜的培养基上三点接种，在合适的温度下，培养4天，7天，或14天，三个菌落形态一致，并且同一菌落的菌丝或产孢结构颜色形态一致。

4.2菌丝特征 在特定的培养基或培养条件下菌丝分隔菌丝形态应一致。其他显微结构如产孢结构及孢子形态应一致。